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IPTG | 367-93-1
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中文名稱(chēng):異丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)
參數(shù)品牌:AVT
產(chǎn)品參數(shù)
品牌:AVT
CAS號(hào):367-93-1
儲(chǔ)存方式:推薦2-8℃存儲(chǔ)。
我知道了
產(chǎn)品詳情
宣傳冊(cè)下載
技術(shù)支持及常見(jiàn)問(wèn)題解答

1、中文名稱(chēng):異丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)

2、英文名稱(chēng):Isopropyl β-D-Thiogalactopyranoside

3、化學(xué)名稱(chēng):異丙基β-D-硫代半乳糖苷

4、分子式:C9H18O5S

5、CAS:367-93-1

6、級(jí)別:化學(xué)試劑級(jí)

7、貨號(hào):    


一、 理化性質(zhì)

1、 結(jié)構(gòu):

2、性狀:白色晶體粉末

3、純度:≥99%

4、分子量:238.3

5、熔點(diǎn):110℃-114℃

6、比旋光度:-32°

 

二、 運(yùn)輸與保存

推薦2-8℃存儲(chǔ)。

三、 使用注意事項(xiàng)

1、含有 IPTG 的培養(yǎng)基 4℃避光保存,須在 1 周內(nèi)使用。

2、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。

3、本產(chǎn)品僅作科研用途。

 

四、 應(yīng)用

1、儲(chǔ)存液配制

①稱(chēng)取 0.238 g IPTG;加入10 mL去離子水充分溶解,配制 0.1 M 的儲(chǔ)存液;

②用5-10 mL去離子水潤(rùn)濕0.22μm濾膜;

③上述 IPTG 溶液用0.22μm濾膜除菌,分裝成 1 mL,-20℃冷凍保存。

 

2、 藍(lán)白斑篩選

IPTG是β-半乳糖苷酶的活性誘導(dǎo)物質(zhì)。基于這個(gè)特性,當(dāng)pUC系列的載體DNA(或其他帶有l(wèi)acZ 基因載體DNA)以lacZ 缺失細(xì)胞為宿主進(jìn)行轉(zhuǎn)化時(shí)、或用M13噬菌體的載體DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)染時(shí),如果在平板培養(yǎng)基中加入X-gal和IPTG,由于β-半乳糖苷酶的α-互補(bǔ)性,可以根據(jù)是否呈現(xiàn)白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑選出基因重組體。此外,它還可以作為具有l(wèi)ac或tac等啟動(dòng)子的表達(dá)載體的表達(dá)誘導(dǎo)物使用。

(1) X-Gal、IPTG 加入瓊脂培養(yǎng)基溶液

①高壓滅菌已加瓊脂的培養(yǎng)基,并冷卻到 50℃左右。

②每毫升培養(yǎng)基內(nèi)加入 10μL 20 mg/mL X-gal 溶液、10μL 0.1 M 的 IPTG(使其終濃度達(dá)到 1 mM);

③加入適量抗生素;

④混勻后按照平板大小倒入適量培養(yǎng)基,待培養(yǎng)基冷卻至室溫后,接種細(xì)菌于 37℃過(guò)夜培養(yǎng)。

(2)X-Gal、IPTG 加到瓊脂平板表面

①于無(wú)菌超凈工作臺(tái)制備平板(如LB瓊脂板);

②取40μL 0.1 M IPTG和120μL 20 mg/mL X-gal 混合,均勻地涂布于準(zhǔn)備好的平板上;

備注:平板邊緣較難充分涂布均勻,容易產(chǎn)生假陽(yáng)性,因此,為了得到更好結(jié)果,建議后續(xù)操作中盡可能在平板中間挑取單克隆。

③37℃孵育直至所有液體被吸收(30 min 或更長(zhǎng))。接種細(xì)菌于 37℃過(guò)夜培養(yǎng)直到菌落形成。

④根據(jù)長(zhǎng)出菌體的藍(lán)白色,方便地挑選出基因重組體(白色為具有DNA插入片段的基因重組體)。


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A.V.T致力于為中國(guó)客戶(hù)提供品質(zhì)高輔料產(chǎn)品與技術(shù)服務(wù)。如您在使用中有任何疑問(wèn),請(qǐng)聯(lián)系我方銷(xiāo)售人員,或致電021-58876118,我們將竭誠(chéng)為您服務(wù)。您也可以登錄AVT官網(wǎng)www.avt- avt.com查詢(xún)相關(guān)信息,感謝您的支持。
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2、英文名稱(chēng):Isopropyl β-D-Thiogalactopyranoside

3、化學(xué)名稱(chēng):異丙基β-D-硫代半乳糖苷

4、分子式:C9H18O5S

5、CAS:367-93-1

6、級(jí)別:化學(xué)試劑級(jí)

7、貨號(hào):    


一、 理化性質(zhì)

1、 結(jié)構(gòu):

2、性狀:白色晶體粉末

3、純度:≥99%

4、分子量:238.3

5、熔點(diǎn):110℃-114℃

6、比旋光度:-32°

 

二、 運(yùn)輸與保存

推薦2-8℃存儲(chǔ)。

三、 使用注意事項(xiàng)

1、含有 IPTG 的培養(yǎng)基 4℃避光保存,須在 1 周內(nèi)使用。

2、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。

3、本產(chǎn)品僅作科研用途。

 

四、 應(yīng)用

1、儲(chǔ)存液配制

①稱(chēng)取 0.238 g IPTG;加入10 mL去離子水充分溶解,配制 0.1 M 的儲(chǔ)存液;

②用5-10 mL去離子水潤(rùn)濕0.22μm濾膜;

③上述 IPTG 溶液用0.22μm濾膜除菌,分裝成 1 mL,-20℃冷凍保存。

 

2、 藍(lán)白斑篩選

IPTG是β-半乳糖苷酶的活性誘導(dǎo)物質(zhì)?;谶@個(gè)特性,當(dāng)pUC系列的載體DNA(或其他帶有l(wèi)acZ 基因載體DNA)以lacZ 缺失細(xì)胞為宿主進(jìn)行轉(zhuǎn)化時(shí)、或用M13噬菌體的載體DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)染時(shí),如果在平板培養(yǎng)基中加入X-gal和IPTG,由于β-半乳糖苷酶的α-互補(bǔ)性,可以根據(jù)是否呈現(xiàn)白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑選出基因重組體。此外,它還可以作為具有l(wèi)ac或tac等啟動(dòng)子的表達(dá)載體的表達(dá)誘導(dǎo)物使用。

(1) X-Gal、IPTG 加入瓊脂培養(yǎng)基溶液

①高壓滅菌已加瓊脂的培養(yǎng)基,并冷卻到 50℃左右。

②每毫升培養(yǎng)基內(nèi)加入 10μL 20 mg/mL X-gal 溶液、10μL 0.1 M 的 IPTG(使其終濃度達(dá)到 1 mM);

③加入適量抗生素;

④混勻后按照平板大小倒入適量培養(yǎng)基,待培養(yǎng)基冷卻至室溫后,接種細(xì)菌于 37℃過(guò)夜培養(yǎng)。

(2)X-Gal、IPTG 加到瓊脂平板表面

①于無(wú)菌超凈工作臺(tái)制備平板(如LB瓊脂板);

②取40μL 0.1 M IPTG和120μL 20 mg/mL X-gal 混合,均勻地涂布于準(zhǔn)備好的平板上;

備注:平板邊緣較難充分涂布均勻,容易產(chǎn)生假陽(yáng)性,因此,為了得到更好結(jié)果,建議后續(xù)操作中盡可能在平板中間挑取單克隆。

③37℃孵育直至所有液體被吸收(30 min 或更長(zhǎng))。接種細(xì)菌于 37℃過(guò)夜培養(yǎng)直到菌落形成。

④根據(jù)長(zhǎng)出菌體的藍(lán)白色,方便地挑選出基因重組體(白色為具有DNA插入片段的基因重組體)。


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